组培细菌污染处理方案

细菌污染特征：培养基出现乳白色 / 黄 / 橘色黏液状浑浊、云雾状，瓶壁有菌液，多伴随异味；菌落扩散快，短时间整瓶浑浊；区别于霉菌（绒毛状菌丝）。 细菌来源：外植体带菌、接种操作带入、灭菌不彻底、器皿 / 超净台、瓶口残留、母液污染。

一、已经污染的瓶子怎么处理

1. 轻度污染：刚出现、苗状态完好，细菌仅局部，没有侵入苗组织

• 必须在超净台内操作；打开瓶子，把小苗取出，丢弃旧培养基。

• 无菌水冲洗植株 3‑4 遍，尽量冲掉菌体；

• 抗生素浸泡处理：头孢唑林钠 100‑200mg/L 或者羧苄青霉素 200‑300mg/L，浸泡 10‑15min，只浸泡植株，不要长时间泡芽尖；

• 无菌滤纸吸干表面水分，转接至新的灭菌培养基。

⚠️风险：不是 100% 救回，部分细菌已经侵入细胞内部，后期还会复发；同一批反复复发，建议直接淘汰这批材料。

2. 重度污染：培养基大面积浑浊、苗已经发黄水渍化、腐烂、有臭味